農(nóng)藥殘留分析方法的確認(rèn)(一)

時(shí)間：2023-03-25 15:05:58來源：food欄目：食品快速檢測閱讀：

農(nóng)藥殘留分析方法的確認(rèn)(一)

[db:作者] / 2022-11-28 00:00

農(nóng)藥殘留分析方法確認(rèn)或方法驗(yàn)證(method validation)是指為了證實(shí)一個(gè)分析方法能被其他測試者按照預(yù)定的步驟進(jìn)行，而且使用該方法測得的結(jié)果能達(dá)到要求的準(zhǔn)確度和精密度而采取的措施。一般通過實(shí)施方法中所敘述的部分或整個(gè)步驟來達(dá)到這種確認(rèn)。國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)對“方法確認(rèn)”的定義是“通過檢驗(yàn)和提供客觀的證據(jù)可以證實(shí)，作為指定用途的分析方法，能夠達(dá)到其特定的要求”(fit for purpose)。

對一個(gè)分析方法的確認(rèn)，應(yīng)該包括建立方法的性能特征、測定對方法的影響因素及證明該方法與其要求目的任務(wù)是否一致，即經(jīng)過確認(rèn)的方法能可靠地使用。國際上，通常使用不同實(shí)驗(yàn)室間協(xié)作研究的結(jié)果對分析方法進(jìn)行確認(rèn)。但近期一些權(quán)威機(jī)構(gòu)認(rèn)為，單個(gè)實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)規(guī)定的要求在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部對農(nóng)藥殘留分析方法進(jìn)行確認(rèn)。對不同基質(zhì)的樣品，前處理步驟是不一樣的。因此，研究農(nóng)藥殘留分析方法時(shí)，必須開發(fā)該農(nóng)藥在不同樣品基質(zhì)中的殘留分析方法。

確認(rèn)農(nóng)藥殘留分析方法必須提供方法的專一性、線性范圍、準(zhǔn)確度、精密度、檢出限和定量限等方法參數(shù)的確認(rèn)結(jié)果。

(一)方法的專一性

方法的專一性，也稱特異性(specificity)，是指分析方法在樣品基質(zhì)中有其他雜質(zhì)成分時(shí)，能準(zhǔn)確地和特定地測出該農(nóng)藥的母體化合物、有關(guān)代謝物及雜質(zhì)的性能。特異性考察也用于說明干擾物質(zhì)對方法的影響程度，通常可通過峰純度檢驗(yàn)、空白基質(zhì)、質(zhì)譜、高分辨質(zhì)譜和多級質(zhì)譜等手段進(jìn)行確證。

(二)線性范圍

線性范圍(linear range)是通過校準(zhǔn)曲線(calibration curve)考察，是表達(dá)被分析物質(zhì)不同濃度與測定儀器響應(yīng)值之間線性定量關(guān)系的范圍。使用農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，通常測定5個(gè)梯度濃度，每個(gè)濃度平行測定2次以上，采用最小二乘法處理數(shù)據(jù)，得出線性方程和相關(guān)系數(shù)(correlation coefficient)等。一般要求相關(guān)系數(shù)在0.99以上。

(三)準(zhǔn)確度

方法的準(zhǔn)確度(正確度)是指所得結(jié)果與真值的符合程度。農(nóng)藥殘留檢測方法的準(zhǔn)確度一般用回收率進(jìn)行評價(jià)，即空白樣品中加入一定濃度的某一農(nóng)藥后其樣品中此農(nóng)藥測定值對加入值的百分率。根據(jù)《農(nóng)藥殘留檢測方法國家標(biāo)準(zhǔn)編制指南》中的要求，回收率試驗(yàn)原則上應(yīng)做3個(gè)水平添加，添加水平為：

(1)對于禁用物質(zhì)，回收率在方法定量限、兩倍方法定量限和十倍方法定量限進(jìn)行3個(gè)水平試驗(yàn)。

(2)對于已制定最大殘留限量的，一般在1/2最大殘留限量、最大殘留限量、2倍最大殘留限量3個(gè)水平各選1個(gè)合適點(diǎn)進(jìn)行試驗(yàn)。如果最大殘留限量值是定量限，可選擇2倍最大殘留限量和10倍最大殘留限量2個(gè)點(diǎn)進(jìn)行試驗(yàn)。

(3)對于未制定最大殘留限量的，回收率在方法定量限、常見限量指標(biāo)、選一合適點(diǎn)進(jìn)行3水平試驗(yàn)。

每個(gè)水平重復(fù)次數(shù)不少于5次，計(jì)算平均值?；厥章蕝⒖挤秶姳?-2。

表2-2 不同添加水平對回收率的要求

制作添加樣品時(shí)，應(yīng)使用新鮮的食品，均一化并稱量后添加農(nóng)藥。

注1：添加的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積應(yīng)不大于1mL。

注2：農(nóng)藥添加后應(yīng)充分混合，放置30min后再進(jìn)行提取操作。

注3：檢測時(shí)間需要數(shù)日時(shí)，將均一化的樣品冷凍保存，避免多次凍結(jié)以及融解。檢測實(shí)施當(dāng)日制作添加樣品。

一般情況下，用添加法測定回收率。原則上，添加濃度應(yīng)以接近待測樣品的農(nóng)藥含量為宜。但由于待測樣品中的農(nóng)藥殘留量是未知的，因此，一般以該樣品的最大殘留限量和方法定量限(LOQ)作為必選的濃度，即回收率試驗(yàn)必須選至少2個(gè)添加濃度。若沒有最大殘留限量值參照時(shí)，以方法定量限和高于10倍方法定量限的濃度做添加回收率，每一個(gè)濃度進(jìn)行5次以上的重復(fù)試驗(yàn)。添加回收率結(jié)果應(yīng)以接近100%為最佳，但由于雜質(zhì)干擾、操作誤差等諸多因素的影響，實(shí)際結(jié)果會有很大偏差。

添加標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度得到的信噪比一般為10比較合適。近期，由于前處理方法的不斷改進(jìn)和高靈敏度、高選擇性檢測器的出現(xiàn)，分析工作者已可測定樣品中越來越低的農(nóng)藥殘留量。但通常開發(fā)新的殘留分析方法，尤其是設(shè)計(jì)回收率試驗(yàn)時(shí)必須考慮該農(nóng)藥的最大殘留限量。在實(shí)際檢測工作中，質(zhì)控樣品只添加一個(gè)濃度時(shí)，可以選擇2倍定量限附近的添加濃度。

文章來源：《無機(jī)化學(xué)核心教程（第二版）》

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